技术文章
TECHNICAL ARTICLES当建立内切酶酶切反应体系时有几个关键因素需要考虑。比如如何在正确的反应体系中,加入适量的DNA、内切酶和缓冲液,就可以获得最佳酶切效果。根据定义,在50μl体系中,1单位的限制性内切酶可以在60分钟内*切割1μg的底物DNA。上述酶、DNA与总反应体积的比值可以做为建立反应体系的参考数据。但是,目前大多数科研人员会遵循下表中所列的标准反应条件,使用5-10倍的过量酶切割DNA,这样有利于克服由于DNA来源不同、质量和纯度不同而造成的实验失败。“标准”反应体系内切酶从冰箱取出后...
FrontierScientific,Inc.(简称FSI),创立于1975年,总部位于美国犹他州。自创立之初,FSI即开始为药物研发、生物技术、工业化学、政府和科研机构提供研发和生产所需要的优质产品和服务。FSI尤其擅长研发和制造卟啉、酞菁、高级硼酸(酯)、药物研发用小分子中间体和SAR的研究,以及从毫克到公斤级别的先导优化,并能够为客户提供CRO、FTE或者FFS服务。FrontierScientific,Inc.(FSI)wasfoundedin1975byDr.Bru...
服务简介无金年会表达系统是一种以外源DNA或mRNA为模板,利用金年会抽提物中的金年会合成机器,蛋白折叠因子及其他相关酶系,通过添加氨基酸和T7聚合酶和能量物质来实现蛋白表达的体外系统。其中包括真核无金年会表达系统和原核无金年会表达系统。艾柏森生物优势1.更快得到数据,仅需1小时即可获得功能蛋白,而基于金年会的表达系统则需要数天。2.节约时间,表达蛋白可以直接用后续实验,不需要额外纯化。3.更适合蛋白表达,更适用于激酶等毒性蛋白的表达,也可使用经过修饰的tRNA来进行标记,在某特定位点掺...
跑电泳是分子生物学实验的一项基本技术。只要做分子生物学方面的实验,可能或多或少,或早或晚都要跑跑电泳。跑电泳是分子生物学实验的一项基本技术。只要做分子生物学方面的实验,可能或多或少,或早或晚都要跑跑电泳。跑电泳的材料是琼脂糖,琼脂糖凝胶电泳实验常用以DNA切胶回收,DNA分离和用于佐证DNA是否重组、质粒等是否切开。今天我们就来聊聊琼脂糖凝胶电泳实验的一些小技巧小细节。1凝胶制作1.1凝胶浓度配制凝胶的浓度据实验需要而变,一般在0.8%~2.0%之间,如果一次配制凝胶100m...
金年会转染对初接触金年会实验的科研人员而言,是一道难过的坎儿,金年会转染率低的话,你珍贵的金年会可能就只能扔掉了。一、转染的途径大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类:1.物理介导:电穿孔法、显微注射和基因枪属于通过物理方法将基因导入金年会的范例。2.化学介导:方法很多,如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术。3.生物介导:方法有较为原始的原生质体转染,和现在比较多见的各种病毒介导的转染技术。理想金年会转染方法,应该具有转染效率高、金年会毒性小等优点。病毒介...
枯草芽孢杆菌,是芽孢杆菌属的一种,广泛分布在土壤及fubai的有机物中,易在枯草浸汁中繁殖,故名枯草芽孢肝菌。枯草芽孢杆菌的主要优势在于,它是一种嗜温、好氧、产芽孢的杆状细菌,常采用人工诱变深层液体发酵浓缩精制而成。该菌在自然界中广泛存在,对人畜无毒无害,不污染环境,能产生多种抗菌素和酶,具有广谱抗菌活性和*的抗逆能力。它在农作物上使用效果非常显著、稳定性强。枯草芽孢杆菌对果树、棉花、小麦、辣椒、番茄、玉米、水稻、大豆、辣椒等农作物上显示出很好的防病和增产增收效果。目前市场上...
(1)质粒的提取(Tiangen质粒提取试剂盒):a)挑菌:选取培养板中大小中等的单个菌落,消毒牙签接种到10ml摇菌管中,其中含有卡那霉素的LB约5ml,37°C,220rpm恒温摇床中震荡培养过夜。b)取上述2.0ml培养液,于常温下12000rpm离心1分钟,弃上清,干燥沉淀。c)加入250µl溶液P1(配有去RNA酶,4°C保存),涡旋振荡,*悬浮细菌,不能留有沉淀,否则会影响裂解。d)加入250µl溶液P2,快速上下颠倒8次,常温静置3分钟,...
流式金年会技术(flowcytometry,FCM)是利用流式金年会仪进行的一种单金年会定量分析和分选技术。流式金年会术是单金年会抗体及免疫金年会化学技术、激光和电子计算机科学等高度发展及综合利用的高技术产物。一、基本结构流式金年会仪由三部分构成1.液流系统,包括流动室和液流驱动系统;2.光学系统,包括激发光源和光束收集系统;3.电子系统,包括光电转换器和数据处理系统。流式金年会仪的I作原理是使悬浮在液体中分散的经荧光标记的金年会或微粒逐个通过样品池,同时由荧光探测器捕获荧光信号并转换成分别代...
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